Напрям 5. Нанобіотехнології
Мета:розробка тa створення системи для пригнічення росту гліальних пухлин головного мозку за допомогою нанокон’югатів природних полімерів з новими ефективними протипухлинними препаратaми спрямованої дії
Очікувані результати:Випуск нового виду продукції: технології
Етап 1:Дизайн структури поліцефіну (нанокон’югатів PMLA з різними блоками). Синтез і очистка вихідних блоків для кон’югації з PMLA, відпрацювання умов проведення кон’югації. Отримання і очистка нативного білка CHI3L1 з клітинної культури, що його продукує. Отримання рекомбінантного білка CHI3L1 в бактеріальній системі для експресії, отримання антитіл проти CHI3L1
Етап 2:Дизайн і синтез антисенс-олігонуклеотидів до CHI3L1. Отримання різних варіантів кон’югатів PMLA з окремими функціональними модулями. Отримання еукаріотичної клітинної лінії, яка стабільно продукує потенційний онкобілок CHI3L1, характеристика онкогенних властивостей клітин. Інгібування онкогенних властивостей отриманих клітин внаслідок пригнічення активності CHI3L1 за допомогою антисенс-олігонуклеотидів
Етап 3:Синтез нанокон’югатів PMLA з функціональними модулями, очистка і перевірка їхньої структури. Синтез нанокон’югатів з антисенс-олігонуклеотидами до CHI3L1. Перевірка гемолітичних властивостей нанокон’югатів. Перевірка активності нанокон’югатів на культурі клітин
Етап 4:Оптимізація методів синтезу, складу та структури нанокон’югатів на основі отриманих даних щодо біологічної активності. Отримання пухлин у щурів імплантацією у мозок клітин, що стабільно продукують CHI3L1. Характеристика отриманих пухлин. Гістохімічний аналіз пухлин
Етап 5:Синтез нанокон’югатів у препаративному масштабі. Інгібування росту гліальних пухлин in vivo нанокон’югатами з антисенс-олігонуклеотидами до CHI3L1. Визначення ефективності нанокон’югатів у пригніченні продукції CHI3L1 у пухлинних клітинах і супресивного ефекту на ріст і проліферацію клітин